Huynh Đệ Giang Hồ kể về Đại ca Hồng Nhân Tựu sau bao năm lăn lộn trong giới giang hồ, nay muốn rửa tay gác kiếm. Cùng lúc đó, vợ anh sinh cho anh một đứa con trai khiến quyết tâm rời bỏ giang hồ của Hồng Nhân Tựu càng mạnh mẽ. Nhưng giới giang hồ vào thì dễ mà ra thì khó, có kẻ muốn trong 12 tiếng đồng hồ t́ìm cách thủ tiêu Hồng Nhân Tựu, tay sai thân tín của anh là Tả Thủ (Trương Ngọc Hữu) cũng tìm cách chiếm đoạt vị trí của Hồng Nhân Tựu, anh phải ứng phó ra sao...
