Phim hoạt hình Hiệp Sĩ Chuột kể về ngày xửa ngày xưa, khi phép thuật còn tồn tại, có một vùng đất tên Dor khắp nơi đầy ắp tiếng cười cùng những món súp ngon lành. Nhưng rồi một tai nạn xảy ra làm nhà vua đau khổ, còn nhân dân thì mất đi món súp. Ánh mặt trời biến mất. Thế giới chỉ còn màu xám. Tất cả hy vọng rời bỏ vùng đất này. Cho đến khi Despereaux sinh ra. Despereaux Tilling bé nhỏ sinh ra với lòng dũng cảm quá lớn so với sự nhút nhát sợ hãi chung quanh. Từ khi sinh ra, với đôi mắt mở to và đôi tai rất lớn vểnh lên với những câu chuyện, chú nhìn thấy và nghe thấy nhiều hơn tất cả mọi người và không thể cưỡng lại hứng khởi với những chuyến phiêu lưu, điều mà chú không thể sống thiếu! Chú đã thay đổi cuộc sống buồn bã tại Dor và đưa mọi người trở lại những tháng ngày hạnh phúc nhờ lòng dũng cảm của mình.
